imunofixácia
Z STD
Odporúčaný termín [?]
| Oblasť: | lekárska veda, imunológia, biochémia |
| Definícia: | imunologická metóda podobná imunoelektroforéze, je to v podstate zónová elektroforéza, izolelektroforéza alebo izotachoforéza zmesi antigénov v agarózovom, polyakrylamidovom alebo acetylcelulózovom géle, pričom pomocou imunofixácie sa detegujú len niektoré z rozdelených antigénov |
| Zdroj: | Kadlec, O. et al.: Encyklopédia medicíny. I. Bratislava: Asklepios 1993. |
| Synonymum: | priama imunoelektroforéza, imunofixačná elektroforéza, ELFO |
| Príbuzné termíny: | imunoelektroforéza, elektroforéza |
| Poznámka: | Antisérum sa však aplikuje na elektroforeogram a reakcia antigén–protilátka prebieha okamžite. Možno ju rozdeliť na tri fázy: 1. ELFO; 2. aplikácia antiséra; 3. premytie a farbenie. Ako médiá na ELFO sa používa agaróza alebo gél acetylovanej celulózy. Na dosiahnutie dobrých výsledkov treba používať monošpecifické antiséra vysokej kvality. Antiséra sa zvyčajne riedia v pomere 1:2 s 0,12 mol barbitalovým tlmivým roztokom s pH 8,6, ktorý obsahuje 80 g/l polyetylénglykolu 6000 (Riches 1985). Po ELFO separácii sa zóna rozdelených bielkovín prekryje pásikom acetylovanej celulózy nasiaknutým antisérom. Po imunofixácii treba vymyť všetky neprecipitujúce bielkoviny. Imunoprecipitát sa potom farbí obvyklými metódami, napr. pomocou amidočerne 10 B, brómfenolovej modrej alebo metylénovej modrej (coomassie blue). |
